第二节 刺五加现代药学研究
一、刺五加制剂品种
（一）固体制剂
1.刺五加片
刺五加浸膏150g，辅料适量。取刺五加粗粉3000g，加7倍量75%乙醇回流12小时，滤过；滤液回收乙醇，浓缩成稠浸膏150g；取刺五加稠浸膏，加辅料适量，混匀，制颗粒，压制成1000片，包糖衣。本品除去糖衣后呈棕褐色，味微苦、涩。本品除去糖衣，研细，加乙醇提取液滤过，滤液加3%碳酸钠溶液与新制的重氮对硝基苯胺试液即显红色。本品以甲醇做溶剂测定浸出物，每片含浸出物不得少于80mg。
曲中原等采用L9（34）正交试验法考察刺五加总苷提取的各影响因素（A：乙醇体积分数、B：溶剂量、C：提取次数），以多指标（刺五加总苷收率、丁香苷质量分数及浸膏得率）综合评分法进行直观分析及方差分析，确定最佳提取工艺条件。试验结果表明，影响刺五加总苷提取的主要因素为B（溶剂量），优选出最佳提取工艺条件为乙醇体积分数60%，10倍量，提取2次，每次1小时。曲中原等又采用L9（34）正交试验法考察影响片剂制备工艺的各因素（A：淀粉用量、B：糊精用量、C：蔗糖用量），以多指标综合评分法进行直观分析及方差分析，筛选出符合片剂成型质量要求的处方，并运用高效液相色谱法测定刺五加总苷片中紫丁香苷的量，对制剂的质量标准进行研究（本品每克刺五加总苷片中含紫丁香苷不得少于4mg）。结果最佳处方为：刺五加总苷浸膏粉末20g，淀粉10g，糊精15g，蔗糖2g。
2.刺五加王浆片
刺五加浸膏100g，王浆粉56.7g，辅料适量。取刺五加浸膏与辅料混匀，制粒，干燥，加入王浆粉，混匀，压制成1000片，片心重0.22g，包糖衣。除去糖衣呈棕褐色，味微苦。除去糖衣，加水提取滤过，取滤液加0.2%茚三酮试液，呈紫色。本品除去糖衣，研细，加乙醇提取滤过，滤液加3%碳酸钠溶液与新制的重氮对硝基苯胺试液1～2滴，显红色。
3.五加首乌片
刺五加浸膏75g，制何首乌360g，辅料适量。先取制何首乌140g粉碎成细粉，过筛；另取制何首乌220g加水煎煮2次，滤过，合并滤液，浓缩，干燥，粉细粉。将上述2种何首乌细粉与辅料及预热的刺五加浸膏混匀，制粒，干燥，压制成1000片，包糖衣，即得。每基片重0.26g。除去糖衣后呈黄棕色，味微苦、涩。本品除去糖衣研细，加甲醇振摇，滤过。取滤液加10%α-萘酚的乙醇溶液1～2滴，摇匀，沿管壁加硫酸1mL，显紫红色环；取滤液加3%碳酸钠溶液与新配制的重氮对硝基苯胺试液1～2滴，即显红色。取本品细粉适量，另取制首乌粉0.5g，刺五加浸膏，分别加入甲醇回流，滤过，滤液点于同一层析纸上，用醋酸-盐酸-水（30：3：10）上行展开，取出，晾干后置紫外灯下观察：首乌液与供试品溶液在相应位置的斑点显亮紫色荧光，刺五加浸膏液与供试品溶液在相应位置的斑点显亮蓝色荧光。
4.复方刺五加片
刺五加浸膏50g，玉竹200g，黄芪100g，当归100g，维生素B15g。以上五味，黄芪、当归及玉竹1/2量粉碎成粗粉，照渗漉法，用60%乙醇做溶媒，依法制成流浸膏；其余玉竹粉碎成细粉，过筛；将刺五加浸膏，上述流浸膏、药粉、维生素B1及适量辅料混匀，制粒，干燥，压制成1000片，片心重0.37g，包糖衣。本品除去糖衣后，呈棕褐色，味微苦。
5.刺五加脑灵口腔崩解片
刺五加脑灵口腔崩解片是由我国《中药部颁标准》第18册收载的刺五加脑灵液改变剂型而得。用于心脾两虚、脾肾不足所致的心神不宁，失眠多梦，健忘，倦怠乏力，食欲不振。谢瑛等通过研究得出，刺五加脑灵口腔崩解片处方：刺五加浸膏15g，五味子流浸膏15g，微晶纤维素30g，甘露醇30g，低取代羟丙基纤维素10g，硬脂酸镁1g，聚乙烯吡咯烷酮适量，共制成1000片。制备方法：取处方量刺五加浸膏和五味子流浸膏（每1g浸膏相当于原药材3g）、微晶纤维素、甘露醇、低取代羟丙基纤维素分别研细，过4号筛，混合，将聚乙烯吡咯烷酮溶于适量60%乙醇中做为黏合剂，制软材，湿法制粒，60℃鼓风烘干，过筛后，加硬脂酸镁，整粒，混匀，压片，即得。
（二）液体制剂
1.刺五加浸膏
刺五加（粗粉）1000g，75%乙醇适量。刺五加粗粉加7倍量的75%乙醇，加热回流提取12小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成浸膏50g，即得。本品为黑褐色的稠膏状物；具刺五加特殊香气，味略苦涩。本品用40倍量乙醇溶解，取其滤液加3%碳酸钠溶液1mL与新制的重氮对硝基苯胺试液2滴，即显红色；另取其滤液加5%亚硝酸钠溶液与10%硝酸铝溶液稍放置，加氢氧化钠试液即显红棕色。在105℃干燥至恒重，减失重量不得超过20.0%；依《中国药典》1990年版规定的铁盐检查法检查，与标准铁溶液1.5mL制成的对照溶液比色，不得更深（0.003%）；用20倍量甲醇做溶剂，浸出物不得少于60.0%。
2.刺五加补膏
刺五加400g，枸杞子80g，五味子125g，黄芪80g，蜂蜜200g，饴糖700g，香精适量。取上药四味，粉碎。分别用4倍量70%乙醇回流2次，滤过；合并滤液，回收乙醇，浓缩成膏，将各膏与蜂蜜及饴糖、香精混匀，制成1000g，分装。本品为黄褐色稠厚的半流体；味酸、甜。含总黄酮量按无水芦丁计算应不低于45%（mg/g）。
3.复方刺五加糖浆
刺五加浸膏20g，五味子流浸膏10g，乙醇300mL，蔗糖300g，水适量。用乙醇150mL和水适量溶解刺五加浸膏后，再加入五味子流浸膏，搅匀，静置澄清，取上清液，备用。蔗糖加水溶解，煮沸30分钟，滤过；加入上述清液及剩余的乙醇，搅匀，加水至1000mL，搅匀，滤过，分装，即得。本品为棕色的黏稠液体；味甜、酸。本品甲醇提取液加10%α-萘酚试液，加浓硫酸，呈紫红色环；加3%碳酸钠溶液后加新配制的重氮化试剂应呈红色。
4.刺五加冲剂
刺五加水浸膏700g，糊精12g，白糖12000g。刺五加水浸膏加60%乙醇适量，搅匀；加白糖粉和糊精，混匀，制粒，减压干燥，整粒，即得。本品为淡黄色颗粒，本品溶液与碳酸钠及重氮对硝基苯胺试液反应显红棕色，与三氯化铁及铁氰化钾混合显绿色。
5.五加参精
刺五加清膏175g，蜂蜜200g，苯甲酸钠3g，乙醇90mL。刺五加酌情予碎断，加水煎2次，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度为1.10的浸膏（80℃测），放冷。加3倍量乙醇，静置，上清液回收乙醇并浓缩至相对密度为1.26的清膏（80℃测）。清膏用乙醇处理2次，静置。上清液回收乙醇，加炼蜜、乙醇、苯甲酸钠，加水至1000mL，搅匀，静置，滤过，按每支10mL分装。本品为红褐色澄明液体，味甘、苦、微辛。本品加入5%亚硝酸钠溶液与10%硝酸铝溶液及1mol/L的氢氧化钠试剂，应显红色，pH值应为4.0～5.0，相对密度应为1.05以上。
6.五加参归芪精
刺五加200g，黄芪200g，当归100g，蜂蜜500g，山梨酸2g，枸椽酸钠6g。取刺五加加水煎煮4次，滤过，合并滤液，浓缩至糖浆状；加入3倍量95%乙醇，放置，滤过，浓缩，加明胶液至无沉淀产生，再加入5倍量95%乙醇，放置滤过，浓缩至稠膏状备用。取黄芪、当归加水煎煮3次，滤过，合并滤液，浓缩至糖浆状；以3倍量95%乙醇处理3次，浓缩至稠膏状备用；将蜂蜜加热熔化，将刺五加、黄芪、当归浸膏加水溶解滤过，滤液加入蜂蜜中，搅匀，依次加入山梨酸醇液及枸橼酸钠液，加蒸馏水至1000mL，静置2天，滤过分装。本品为橙色黏稠澄明液体，味甜。pH值4.5～5.5，相对密度1.14～1.16。
7.五加参蛤蚧精
刺五加130g，蛤蚧（去鳞、头足）2.4g，肉苁蓉50g，人参50g，人参露（加工红参或人参的蒸馏液）350mL。以上五味，刺五加制成刺五加浸膏；蛤蚧粉碎成粗粉，加稀乙醇30mL，浸渍7天后，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至60mL，加3倍量乙醇，搅拌，静置24小时，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至6mL；肉苁蓉粉碎成粗粉，加热回流提取2次，每次2小时，合并提取液，滤过，浓缩至5mL，加乙醇，静置24小时，滤过，滤液浓缩至无醇味，加蒸馏水适量溶解，滤过；人参酌予碎断，加3倍量稀乙醇回流提取5次，合并提取液，浓缩，加3倍量乙醇，搅拌，静置24小时，取上清液另置，沉淀用3倍量65%乙醇洗脱，合并上清液与洗脱液，回收乙醇，浓缩至适量，蔗糖制成单糖浆，加入人参浓缩液中，搅拌，混匀，加水制成500mL。将上述刺五加浸膏、蛤蚧、肉苁蓉提取物加蒸馏水稀释后加入人参糖浆、人参露350mL及山梨酸1.14g（醇溶），搅拌混匀，加水至1000mL，低温静置，滤过，滤液加香精适量，混匀，分装，每支10mL。本品为棕黄色的澄明液体；气香，味甜、微苦。pH值4.0～5.0。
8.刺五加注射液
刺五加（全株）1000g，注射用水适量。将刺五加全株粉碎，水煎液按石硫醇法处理，滤液加活性炭适量，滤过；加注射用水至1000mL，灌封，灭菌，即得。每支20mL，每1mL含总黄酮按无水芦丁计算，不得低于5mg，为棕色澄明液体，pH值应为6.0～7.0。
9.刺五加滴丸
刺五加药材加75%乙醇7倍量，回流提取3次，每次2小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇至尽，取上清液备用。上清液加入已处理的大孔树脂柱，吸附、洗脱，洗脱液浓缩成稠浸膏。称取PEG6000、PEG4000、适量PEG400置水浴锅内，加热熔融，并不断搅拌，温度控制在60℃左右，至无气泡产出。将浸膏加入上述基质溶液中，搅拌均匀后，倾入滴丸滴制设备的储液槽内，在70℃保温，并吹入热空气，以液体石蜡、二甲基硅油混合（比例为1：5）做冷凝液，滴制成刺五加滴丸。将滴出的滴丸滴入冷凝液中（室温），注意滴头与冷凝液表面的距离为3cm，然后捞出制备成型的滴丸，用石油醚清洗，晾干，即得。
10.刺五加叶总皂苷合剂
刺五加叶总皂苷合剂的有效成分为刺五加叶总皂苷，具有补益强壮、益气健脾、扶正固本作用，是一种免疫增强剂。能调节人体新陈代谢，增强人体对各种疾病的抵抗力，用于治疗神经衰弱，心血管疾病，血细胞减少，高血脂和高血压等症。制法：采用水煎醇沉法提取刺五加叶总皂苷并依法制成合剂。性状：本品为污黄色黏稠状的混悬液，具有刺五加特有的微香气，味甜。鉴别：取本品1mL，加5%硫酸水溶液20mL，置沸水浴上水解1小时，冷却后，加氯仿萃取（3×20mL），合并氯仿溶液，以水洗至中性，回收氯仿至干，用甲醇1mL溶解，作为供试品溶液。另取齐墩果酸1mL，以甲醇定量溶解于1mL量瓶中，作为对照品溶液。分别吸取上述2种溶液各4μL，点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-乙酸乙脂（3：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸溶液，105℃加热。供试品色谱中，在与对照品溶液相应位置上，显相同的紫红色斑点。检查：pH值应为3.5～6.0；相对密度为1.13～1.20。
（三）半固体制剂
刺五加黄芪凝胶
用水煎醇沉的方法从生药材刺五加和黄芪中提取其主要成分，以卡波姆940为基质，制备成刺五加黄芪凝胶。
（四）保健药品及食品
1.刺五加茶
工艺流程为：①采摘与分类：采摘原始森林中的纯天然刺五加嫩叶，一般在上午10时左右，此时阳光初照，露水已干。选择形态整齐美观、不带叶柄、无斑点、无害虫、有光泽的叶片进行采摘。②摊凉与萎凋：将采摘的刺五加鲜叶摊放在竹筛上，放置于阳光下20分钟，并轻翻动2～3次，当顶叶下垂并失去光泽、水分减少10%左右、手捏有弹性时即可。时间与翻动次数依气候而定，如果是雨天则在室内进行。③高温杀青：由于刺五加鲜叶是纸质叶片，杀青温度为200℃～220℃，杀青时间为5～8分钟，以高温破坏酶的活性。同时，因杀青时叶片中的水分大量蒸发，使叶质柔软，散发出刺五加固有的香味，以利于揉捻成型。④揉捻（轻重轻）：将刺五加杀青叶片快速放入揉捻机内进行揉捻，采用轻、重、轻的原则，揉捻5～6分钟，使叶片卷成条索，破碎叶细胞挤出汁，黏附于叶表面，易于冲泡。⑤干燥造型：干燥造型应根据不同造型而掌握干燥时间。根据吉林益华有机科技发展有限公司做珠型刺五加茶的经验，首次干燥温度为150℃～180℃，时间3～5分钟，随后次数、温度、时间依包揉而定。⑥包装与储藏：当刺五加茶烘干至含水量为10%左右时要及时进行摊凉1小时，随后立即复火，待含水量烘干至6%～7%时结束干燥。冷却后应选择干燥、避光、阴凉的地方及时包装入库，不能与有异味的产品放在一起，最好在零下3℃左右冷藏，这样可保持刺五加茶的新鲜度。
2.刺五加发酵乳饮料
以刺五加嫩叶和鲜牛乳为主要原料，杀菌后接种乳酸菌进行乳酸发酵，在此基础上添加各种辅料制成发酵乳饮料，通过单因素试验及正交试验确定原料的配比、发酵条件及产品的配方。
3.刺五加果果汁
刺五加果果汁饮料的生产工艺和配方，着重研究了如何改善刺五加果汁的风味和稳定性。刺五加果经破碎榨汁，160目滤布过滤，按果汁浓度6%、白砂糖7.5%、柠檬酸0.08%进行调配，在60℃、25MPa压力下均质两次，灌装密封后，在100℃下杀菌10分钟，便可获得营养丰富、风味好、具有保健作用的刺五加果果汁饮料。
二、刺五加主要成分的提取工艺研究
1.刺五加多糖提取工艺研究
刺五加多糖的提取以刺五加根为原料，经乙醇提取先除去其中的脂溶性成分后，再依次采用水、冷碱、热碱和酸对其多糖组分进行提取，分别得到冷碱提水溶组分（ASC-1）、冷碱提水不溶组分（ASC-2），热碱提水溶组分（ASH-1）、热碱提水不溶组分（ASH-2），酸提水溶组分（ASA-1）和酸提水不溶组分（ASA-2）。刺五加粗多糖提取的实验方法：
（1）原料的预处理 对刺五加根以清水进行洗刷，除去表面的泥沙等附着物。将洗净的刺五加根置于55℃烘箱中干燥。干燥后用粉碎机将其粉碎，过60目筛，备用。
（2）乙醇提取 取200g粉碎为60目的刺五加原料粉，置于3000mL三颈瓶中，加入1600mL80%乙醇，在85℃水浴中加热搅拌提取2次，每次1小时，离心，合并上清液（另作他用），得到固形物A1。
（3）水提取 将固形物A1加入1600mL蒸馏水中，在100℃水浴中搅拌提取2次，每次1小时，离心，合并上清液（另作他用），得到固形物A2。将固形物A2用95%乙醇脱水，置于55℃烘箱中烘干。
（4）冷碱提取 刺五加根经过乙醇、水提取后采用冷碱提取，具体提取流程见图2-1。
图2-1 冷碱提取流程图
（5）热碱提取 固形物A3加入NaOH溶液，在60℃水浴中加热搅拌提取1小时，离心，得到上清液和固形物A4。上清液用冰醋酸中和至pH值为7，置于4℃冰箱过夜，离心，得到热碱提水不溶组分。固形物A4继续进行酸提取。
（6）酸提取 固形物A4加入1600mL2%的盐酸，在60℃水浴中加热搅拌提取1小时，离心，得到上清液和固形物A5。上清液用冰醋酸中和至pH值为7，置于4℃冰箱过夜，离心，得到酸提水溶组分和酸提水不溶组分。
冷碱提、热碱提、酸提具体提取工艺流程如图2-2所示。
2.刺五加苷B、刺五加总苷的提取纯化工艺研究
（1）提取方法 刺五加苷B、刺五加总苷的提取传统采用回流提取的方法，以乙醇的浓度、用量、提取次数等几方面为实验因素提取刺五加中的总苷成分，并采用高效液相法测定刺五加总苷中刺五加苷B的含量，确定最佳提取工艺。经过正交试验确定各影响因素的显著性，并结合工业化生产成本及生产效率方面考虑，一般选用60%～80%乙醇，提取2～3次，提取溶剂用量为6～12倍，提取时间1～3小时。刺五加总苷提取率为2%左右、刺五加苷B含量为0.7%左右，不同的提取工艺和刺五加药材对其含量影响较大。刺五加中的苷类物质是重要的生物活性成分，其中以刺五加苷B含量最高，占总苷含量约20%，药理活性较明显。
图2-2 刺五加多糖提取流程
（2）刺五加苷大孔树脂的纯化文献报道以AB-8、D-101大孔吸附树脂为纯化刺五加苷所用的树脂，多以刺五加苷B或总苷含量为指标进行考察。大孔树脂的考察指标有树脂型号、上样量、上样速度、水洗用量、洗脱剂、洗脱剂的成分、洗脱剂流速和树脂可重复利用次数等，来确定最佳的工艺指标。
3.刺五加总黄酮提取工艺研究
马海涛等采用均匀设计方法，应用紫外分光光度法测定了刺五加中总黄酮的含量，最后确定以50%的乙醇浓度、20倍量、提取3次、30分钟/次为最佳提取工艺。
郭文晶等研究了从刺五加叶中超高压提取总黄酮的工艺条件。通过单因素试验确定了各影响因素的较优水平范围，在此基础上采用均匀设计方法进一步优化出最优提取工艺参数为：压力485MPa，保压5分钟，乙醇体积分数40%，固液质量体积比1：50（g/mL）。在此条件下刺五加叶中总黄酮的提取率可达7.76%，比回流法和超声法分别提高了31%和11%，提取时间分别只有二者的1/24和1/6。超高压提取时间短、提取率高，是一种全新的、快速有效的提取方法。
刘莹等以总黄酮提取率为考察指标，通过单因素及正交实验考察机械化学法辅助提取刺五加总黄酮的主要影响因素，确定最佳工艺条件；采用分光光度法测定总黄酮含量。最佳工艺条件为：Na2CO3/Na2B4O7辅助剂用量4%（W/W），物料粒度D95≤37μm，乙醇浓度为20%（V/V），料液比为1：60（g/mL）。该工艺条件下，总黄酮提取率比热回流法提高13.2%。机械化学法辅助提取具有提取率高、时间短、无需加热、乙醇用量少等特点，是提取刺五加总黄酮的一种有效方法。
4.刺五加中异嗪皮啶的提取工艺研究
陆兔林等以异嗪皮啶和甲醇浸出物为指标，采用正交试验法，对最佳提取工艺进行工艺参数考察。结果以刺五加粗粉加12倍量的75%乙醇分3次回流提取，每次2小时为最佳提取工艺，该提取工艺合理，生产实际操作简单，适合于大规模生产。
马新飞等以异嗪皮啶为指标，采用高效液相色谱法进行分析测定，考察不同溶剂、不同提取方式、不同水解方式对异嗪皮啶提取率的影响。结果以刺五加药材粉末加甲醇回流提取，硫酸水解，以氯仿萃取可获得较高提取率，表明不同溶剂、不同提取方式、不同水解方式对异嗪皮啶的提取率有较大影响。
袁昕蓉等采用正交设计，考察溶剂量、提取时间和提取次数3个因素对游离异嗪皮啶含量的影响及水解时间、H2SO4浓度、H2SO4量对结合型异嗪皮啶含量的影响，优化后的提取工艺为：用12倍量甲醇，提取60分钟，提取3次。水解工艺为10倍量，15%硫酸，水解2小时。
5.刺五加中刺五加苷E的提取工艺研究
樊如强等以刺五加苷E含量为指标，采用大孔树脂法，分别对HP20、D101、AB-8及NKA-9四种大孔树脂进行动静态分析，优选出最佳大孔树脂，即AB-8型大孔树脂效果最佳。最佳工艺条件为：浓度0.5g/mL，吸附流速2BV/h，上样量5BV，洗脱剂30%乙醇，用量11BV，洗脱流速1BV/h。
三、刺五加成分的含量测定
刺五加及其制剂中有效成分刺五加苷B、刺五加苷D、异嗪皮啶及总黄酮等的含量测定方法有UV法、TLC比色法、HPLC法、比色法、TLC扫描法。测得的含量依药材的部位、产地、采收期、生长期及贮藏期的不同而变化。以下介绍与药材质量有关的几种主要有效成分的含量测定结果。
1.刺五加多糖的含量测定方法
陈芬芳等以葡萄糖为对照品，采用苯酚-硫酸法测定刺五加药用植物多糖的含量。结果表明，葡萄糖标准曲线为A=0.0133C-0.0025，r2=0.9975，范围为10～80μg/mL。刺五加多糖含量为2.40%。该方法精密度良好，反应产物在2小时内吸光值稳定，平均回收率为99.1%。
测定波长选择：精密量取一定浓度的刺五加供试品溶液，采用苯酚-硫酸法，以蒸馏水做空白对照，在波长430～550nm范围内进行扫描。选择最大吸收波长做为刺五加多糖的吸收波长进行测定，测得最大吸收波长为490nm。
线性关系考察：分别精密量取对照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6mL，置于20mL具塞的试管中，各加蒸馏水至2mL，加入1mL6%的苯酚溶液，沿壁迅速加入7mL浓硫酸，迅速摇匀，放置10分钟，在80℃恒温水浴锅内反应15分钟，取出后冷却至室温，另以蒸馏水为空白对照，在最大吸收波长处测定吸光度（A）值。以葡萄糖浓度（C）为横坐标，A为纵坐标进行线性回归分析，绘制葡萄糖标准曲线。
样品含量测定：制得刺五加提取液，减压抽滤后得滤液，记录滤液体积，然后精密量取1mL加入50mL容量瓶中，定容，摇匀。测定吸光度值。根据下式计算样品中多糖含量：多糖含量（%）=（C×D）/m×100%。
式中：C为测得样品溶液中葡萄糖的含量（μg/mL），D为样品溶液的最终稀释体积（mL），m为样品质量（μg）。计算得样品溶液中刺五加多糖含量为2.40%。
2.刺五加苷B的含量测定方法
彭新生等采用高效液相色谱法，研究了不同生长年限、不同药用部位的刺五加中刺五加苷B含量的变化规律。结果显示，3年生刺五加中刺五加苷B的含量高于1年生刺五加，且均以茎皮中含量较高，茎中含量次之，根中最低。
色谱条件及系统适用性试验：色谱柱：HypersilC18（4.6mm×250mm，5μm）；流动相：乙腈、水；梯度洗脱条件：流动相从5%乙腈到45%乙腈，分析时间为15分钟；检测波长：264nm；柱温：35℃；流速：1mL/min。
制备对照品溶液，绘制标准曲线：精取刺五加苷B对照品溶液，分别进样1、2、4、8、10、20μL，以进样量与峰面积进行线性回归，以进样量（μg）为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，回归方程为Y=13912.88X-2270.09（r=0.9998）；线性范围为0.24～4.8μg。
刺五加药材中刺五加苷B的含量测定：精密称取刺五加粉末（60目）300mg，置50mL量瓶中，加甲醇20mL，超声提取30分钟，离心15分钟，取上清液用0.45μm微孔滤膜过滤，得供试品溶液，取10μL注入液相色谱仪中，测定刺五加苷B含量。
张崇禧等利用Alltech高效液相色谱仪对不同采收期刺五加根与茎中的刺五加苷B的含量进行测定。色谱柱为ODS-C18（4.6mm×250mm，5μm）；流动相：乙腈-水（20：80）；检测波长：265nm。结果：刺五加苷B在0.1～2.0μg与峰面积具有良好的线性关系，以10月25日采收的仿生刺五加根中刺五加苷B含量最高，为0.204%。结论：本方法简便、快速、可靠、易行、重现性好，适合刺五加苷B的含量测定。
3.刺五加总苷的含量测定方法
杜爱琴等以刺五加总苷的相对含量为指标，采用紫外分光光度法确定分析方法。刺五加总苷含量快速测定条件为以质量分数为75%的乙醇做参比，测定波长325nm。
刺五加总苷最大紫外吸收波长的确定：用吸量管准确吸取提取清液总体积的1.00%，用质量分数为75%的乙醇稀释至10mL，取1mL再稀释至25mL，以质量分数为75%的乙醇溶剂做参比，在300～400nm内测定，绘制吸收曲线。实验结果表明，波长325nm为最大吸收波长。
金焱等采用AB-8型大孔吸附树脂分离刺五加总皂苷，利用此类化合物的分子结构皆为三萜皂苷，在齐墩果烷型配基上连有单糖链或双糖链，与香草醛浓硫酸加热反应生成物在540nm处显最大吸收的特性，选用齐墩果酸为对照品，用UV法测定刺五加总皂苷的含量。结果：该方法在20.96～125.76μg浓度范围内具有良好的线性关系，r=0.9999；平均回收率为99.64%，RSD为0.56%。结论：该方法准确、可靠、重复性好，可做为刺五加口服液质量控制的方法。
4.刺五加总黄酮的含量测定方法
张崇禧等使用722S分光光度计应用比色法，以芦丁为对照品，在420nm下测定吸光度，计算刺五加根与茎中总黄酮的含量。结果：在0.059～0.2065mg范围内，芦丁质量与吸光度A值线性关系良好，平均回收率为100.46%，r2=0.999，RSD为0.77%。茎中总黄酮含量以4月6日采收的野生品中含量最高，为5.30%；根中总黄酮含量以10月25日采收的仿生刺五加根中最高，为16.12%。结论：本方法简便、快速、可靠、易行、重现性好，适合刺五加总黄酮的含量测定。
显色剂溶液的配制：0.1mol/L三氯化铝溶液的配制：取结晶三氯化铝2.46g于100mL量瓶中，用无水乙醇定容，摇匀，备用。1mol/L醋酸钠溶液的配制：取结晶醋酸钠13.6g于100mL量瓶中，用蒸馏水定容，摇匀，备用。
对照品溶液的制备：精密称取干燥至恒重的芦丁对照品5.8mg，置50mL量瓶中，以75%乙醇定容至刻度。
标准曲线的制备：吸取对照品溶液0、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5mL于7支250mL试管中，加试剂75%乙醇，氯化铝溶液3mL，醋酸钠溶液5mL，混匀，静置40分钟。在420nm处测吸光度，3次平行，以吸收值A为纵坐标，质量（mg）为横坐标，绘制标准曲线，将所得数据进行统计处理，得回归方程，Y=0.1035X+0.1299，r2=0.999。
样品溶液的制备：取干燥的刺五加样品（过40目筛）各约1000mg，精密称定，置50mL具塞锥形瓶中，分别精密加入75%乙醇40mL、30mL、30mL，密塞超声30分钟（共3次），合并提取液，摇匀，过滤，转移至100mL量瓶中定容。吸取5mL于试管中，加入75%乙醇1mL、0.1mol/L三氯化铝溶液3.0mL及1mol/L醋酸钠溶液5.0mL，摇匀，静置40分钟，备用。
样品中总黄酮含量的测定：在420nm处测吸光度，3次平行，得刺五加总黄酮的含量。
5.异嗪皮啶的含量测定方法
张萍采用高效液相色谱法，色谱柱：KromasilC18分析柱（200mm×4.6mm，5μm）；流动相：乙腈-0.1%磷酸（20：80）；流速：1mL/min；检测波长：343nm；柱温：30℃；进样量：20μL。结果：异嗪皮啶进样量在0.0171～0.3024μg范围内呈现良好的线性关系，平均回收率为99.4%，RSD为2.9%（n=9）。铁西产刺五加根中异嗪皮啶含量2年生最高（110.15μg/g），茎中1年生最高；漠河产不同生长年限刺五加中含量差别不大，根中异嗪皮啶的含量明显高于茎；铁西产刺五加中异嗪皮啶含量比漠河产高。结论：本法操作简便、准确，专属性强，适用于刺五加中异嗪皮啶含量测定，该研究可为刺五加最佳产地、最适宜采收年限及最佳药用部位的确定提供参考。
张海丰等采用AgilentXDB-C18色谱柱（4.6mm×150mm，5μm），以甲醇-0.2%磷酸溶液（27：73）为流动相，流速为1.0mL/min，柱温为室温，进样量10μL，检测波长为343nm。结果异嗪皮啶进样量在0.334～4.175μg/mL内呈良好的线性关系，r=0.9996，平均加样回收率为100.74%，RSD为0.44%（n=6）。结论：该方法灵敏快速、结果准确、重现性好，可用于刺五加果实中异嗪皮啶含量的测定。
6.刺五加苷E的含量测定方法
张琳等建立HPLC-MS/MS方法，进行色谱和质谱方法的考察，得到最优的分析条件，即流动相为乙腈-0.05%的甲酸溶液（20：80，V/V），流速为0.5mL/min。采用电喷雾离子源（ESI）进行电离，多离子反应监测（MRM）模式进行信号采集，采用外标法进行定量；采用HPLC-MS/MS方法测定刺五加果实中刺五加苷E的含量。结果：刺五加苷E在0.4～10000ng/mL浓度范围内呈良好的线性关系（r>0.9997），检出限（LOD）为0.12ng/mL，定量限（LOQ）为0.4ng/mL，不同浓度下的平均加标回收率为98.19%；在最优提取条件下刺五加果实中刺五加苷E的含量为（0.2730±0.0035）mg/g。结论：HPLC-MS/MS法灵敏度高、选择性好、分析时间短，可对刺五加果实中刺五加苷E进行准确的定量分析。
劳凤云等采用高效液相色谱（HPLC）法测定刺五加苷E的含量。结果：在同一色谱条件下，刺五加苷E在2.34～37.52μg/mL范围内线性关系良好，r=0.9996，回收率为101.9%，RSD为2.0%。结论：该分析方法简便、准确、重现性好，可用于刺五加药材中刺五加苷E的含量测定。